心血管疾病研究所2022年第2期（总23期）“Lab and Journal Club”学术沙龙

心血管疾病研究所2022年第2期（总23期）“Lab and Journal Club”学术沙龙

2022年1月21日下午，心研所2022年第2期学术沙龙活动在心研所会议室顺利召开，本次活动邀请了研究所的郑锦荣和王瑞莹副研究员。郑锦荣为大家分享了有关抗纤维化嵌合抗原受体（CAR）T细胞在治疗心肌纤维化中的最新研究进展，王瑞莹为大家分享了其在博士期间的部分研究成果：CE调控BAG3和L-钙通道的相互作用抑制钙内流抗心肌缺血再灌注损伤的分子机制研究。

主讲人：郑锦荣

汇报内容：CAR T cells produced in vivo to treat cardiac injury

心脏纤维化威胁到数百万心脏病患者的健康，对抗纤维化的疗法亟待开发。此项研究开发了一种治疗方法，利用具有T细胞靶向功能的脂质纳米粒（LNPs）传递修饰的信使RNA（mRNA），在体内生成瞬时抗纤维化嵌合抗原受体（CAR）T细胞。将CD5靶向的LNPs注射到心衰小鼠模型中，对体内CAR T细胞的产生进行追踪并对疗效进行评估。发现在体内产生瞬时有效的CAR T细胞，抗纤维化的CAR T细胞表现出星形细胞增多，并在脾脏中积累时保留了靶抗原。

用此种方式治疗可减少心脏损伤后的纤维化并恢复心功能，内源性CAR T细胞形成有望成为各种疾病的治疗平台。

主讲人：王瑞莹

汇报内容：CE调控BAG3和L-钙通道的相互作用抑制钙内流抗心肌缺血再灌注损伤的分子机制研究

背景：CE是龙牙楤木总皂苷中活性较强的成分之一，CE经过肝药酶代谢后依旧以原型化合物的形式存在，且可实现化学合成，这也提示我们CE具有很好的成药性。研究表明CE有较强的心肌保护作用。所以，基于以往的研究，本课题从钙超载的角度研究CE对心肌缺血再灌注损伤的保护作用，阐明CE对BAG3和LTCC相互作用的调控与抗心肌缺血再灌注损伤之间的关系，为CE的新药开发提供依据。

思路：首先我们体内体外实验证明了CE对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用，进一步利用成年大鼠心肌细胞检测肌节收缩和钙瞬变实验证明CE通过抑制钙超载对心肌缺血再灌注损伤发挥保护作用，从钙通路蛋白中筛选出关键蛋白L-钙通道，通过体内体外实验证明了CE通过调控L-钙通道对大鼠心肌缺血再灌注损伤起到保护作用。组学分析BAG3也为CE的关键靶点，我们通过药物亲和反应靶点稳定性实验、免疫共沉淀和免疫荧光共定位实验证明CE通过调控BAG3与LTCC之间相互作用，减少钙内流进而抑制钙超载，对心肌缺血再灌注损伤起到保护作用。

本研究的亮点：采用hiPSC-CMs对机制进行研究，该细胞来源于人，与临床更贴近；采用膜片钳、钙瞬变以及Cardio ECR技术对钙稳态过程进行全面描述，有利于CE对钙超载调控机制的研究；利用DARTS，CO-IP，免疫共定位等方法进行靶标确认和验证。